ПЦР-анализ: что это такое, когда он назначается и как проводится?
Одним из наиболее точных и современных методов диагностики является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Созданный ученым Кэри Муллисом, данный метод попал в число обладателей Нобелевской премии в 1993 году. Это высокотехнологичный лабораторный способ диагностики, который дает возможность выявить различные заболевания на ранней стадии.
Если вам назначено исследование с помощью ПЦР-диагностики, то следует знать, что она проводится специалистами в лабораторных условиях. Для анализа небольшой образец материала — крови, слюны, ткани и т.д. — помещают в специальную пробирку, куда добавляются растворы, необходимые для реакции.
Ответы на все интересующие вас вопросы по ПЦР-диагностике, в том числе о том, как подготовиться к анализу, можно найти в этой статье.
Суть метода ПЦР заключается в использовании молекулярно-биологических принципов, которые позволяют многократно копировать фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, находящихся в биоматериале, например, в крови, с помощью особых ферментов. Результатом ПЦР-диагностики является определение типа возбудителя и его концентрации, для чего полученные фрагменты сверяются с базой данных.
Этот процесс проводится в специальном амплификаторе, который нагревает и охлаждает пробы биоматериала, необходимых для репликации. Точный температурный режим влияет на точность результата ПЦР-диагностики.
Какие сферы применения у метода ПЦР?
Метод ПЦР, или полимеразной цепной реакции, имеет широкий спектр применения в медицине. Он позволяет выявлять различные инфекции и используется для диагностики ВИЧ, герпеса, половых инфекций, кандидоза, гепатитов, мононуклеоза, листериоза, цитомегаловируса, туберкулеза, вируса папилломы человека и клещевого энцефалита [3, 4]. Метод ПЦР также применяется для диагностики вирусных заболеваний, включая коронавирусную инфекцию COVID-19, что особенно актуально в условиях сложной эпидемиологической обстановки.
Кроме того, метод ПЦР используется в криминалистике при необходимости определить, кому принадлежит найденный на месте преступления биоматериал. Он может использоваться также для установления отцовства [1, 2]. Таким образом, метод ПЦР находит свое применение в различных сферах, включая медицину и криминалистику.
Список литературы:
- Измерова, Т. В. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
- Полимеразная цепная реакция (PCR). Справочник по биологии
- Рындак, А. В. ПЦР диагностика (Полимеразная цепная реакция)
- PCR (polymerase chain reaction). Healthdirect
Многие люди задаются вопросом, какие плюсы и минусы имеет диагностика методом ПЦР?
Начнём с преимуществ. Во-первых, ПЦР-анализ позволяет обнаружить возбудителя болезни даже при наличии всего нескольких молекул его ДНК. Это значит, что метод способен выявить заболевание на очень ранних стадиях, а также при хронической форме заболевания и в случаях, когда болезнь проходит латентно и не проявляется явно. Во-вторых, для проведения ПЦР-анализа подходит практически любой биоматериал — от крови и слюны до клеток кожи. В-третьих, исследование одного образца может выявить несколько возбудителей болезни. Кроме того, результат получают оперативно — через 5-7 часов, что позволяет получить заключение уже на следующий день после забора биоматериала. Наконец, метод ПЦР практически не даёт ложноположительных или ложноотрицательных результатов, если была соблюдена технология проведения анализа.
Но со сравнительно новым методом ПЦР существуют и недостатки. Как и у любого другого метода анализа, у ПЦР есть высокие требования к соблюдению технологии и к профессионализму лаборантов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат. Поэтому важно проводить ПЦР-диагностику только в проверенных лабораториях, где внедрены системы контроля качества работы.
Для диагностики различных заболеваний методом ПЦР, необходимо взять соответствующий биоматериал. Выбор биоматериала зависит от типа инфекции. Например, при анализе на ЗППП методом ПЦР используется соскоб или мазок из шейки матки, уретры или мочи. Кровь, в свою очередь, используется для выявления герпеса, цитомегаловируса, гепатита, токсоплазмоза и ВИЧ. Мазок из зева берется для анализа мононуклеоза и цитомегаловируса. Для анализа состояния нервной системы используется спинномозговая жидкость. Если нужно выявить внутриутробные инфекции, необходимо провести исследование ткани плаценты. А для выявления легочных инфекций используют мокроту или плевральную жидкость.
Подготовка к ПЦР-диагностике зависит от биоматериала, который будет использован.
Для сдачи крови необходимо быть натощак утром.
Сбор мочи необходимо осуществлять в стерильный контейнер утром и передать в лабораторию в течение двух часов.
Если необходимо взять мазок или соскоб из урогенитальной области, необходимо воздержаться от половых контактов за несколько дней до сбора материала, а также не проводить спринцевания.
Сдачу мазков или соскобов необходимо отложить на время менструации.
Пациент, который принимает лекарства или БАД, должен сообщить об этом врачу, так как действующие вещества средства могут исказить результаты лабораторного анализа, и возможно, понадобится остановить курс приема.
ПЦР-диагностика — метод, используемый для выявления заболеваний, популярен в медицине благодаря своей точности и скорости. Среди ПЦР-методов выделяют ПЦР в реальном времени, секвенирование, пиросеквенирование, микрофлюидные технологии. В настоящее время наиболее распространенным методом является ПЦР в реальном времени, который позволяет получить результат уже через час, сокращая срок обработки образцов. Этот метод практически не допускает ошибок в диагностике, что повышает его надежность.
Рерайт статьи "Как расшифровать результаты ПЦР-исследования"
Важной задачей для любого пациента является понимание результатов ПЦР-анализа, который может быть положительным или отрицательным. Если результат отрицательный, это указывает на отсутствие следов враждебной ДНК в организме, и тест можно считать успешным. Однако, если результат положительный, значит, в организме есть фрагменты ДНК возбудителя болезни, и необходимо лечение.
Часто ПЦР-диагностика может показать положительный результат, несмотря на отсутствие недомогания и симптомов болезни у пациента. В таких случаях заболевание может находиться на ранних стадиях, что требует проведения дополнительных исследований и немедленного начала лечения. Чем раньше болезнь будет выявлена, тем больше шансов на ее успешное лечение.
ПЦР-диагностика инфекций является очень точным методом. Он позволяет выявить возбудителя болезни даже при наличии всего одной молекулы его ДНК в пробе. Это делает ПЦР-анализ одним из наиболее эффективных инструментов для определения наличия инфекции и контроля за эффективностью лечения.
Фото: freepik.com